红细胞内叶酸含量测定低于,巨幼红细胞贫血的血清叶酸含量测定低于

红细胞内叶酸含量测定低于


1、红细胞内叶酸含量测定低于


D。



2、巨幼红细胞贫血的血清叶酸含量测定低于


B。



3、叶酸测定化学发光法是什么意思


是化学发光技术。红细胞叶酸测定是诊断慢性叶酸缺乏病的较好指标,反映了组织内叶酸的营养状态。叶酸测定化学发光法意思是化学发光技术,化学发光技术是最先进的方法,可同时测定叶酸及维生素B12。



4、巨幼红细胞贫血的血清叶酸含量测定低于


B。



5、红细胞内叶酸含量测定低于


A。



6、叶酸的测定方法是什么?


楼主,您好。 微生物法1.原理叶酸是酪乳酸杆菌(Lactobacillus casei, L. C, ATCC 7469)生长所必需的营养素。在1定条件下,L.C的生长繁殖与培养基中叶酸含量呈正比关系,细菌增殖的量以光密度值计,通过与标准曲线相比较,计算出样品中叶酸的含量。2.适用范围参考《Methods of Vitamin Assay》,第4版。本方法适用于各类食物中叶酸的测定。检测限为0.1ng。3.仪器与设备(1) 恒温培养箱(2) 离心机(3) 高压消毒锅(4) 震荡器(5) 接种针和接种环(6) 分光光度计4.试剂除特殊说明外,本实验中所有试剂均为分析纯,水为蒸馏水。(1) 菌种:酪乳酸杆菌(Lactobacillus casei, L.C, ATCC 7469)(2) 磷酸缓冲液(0.05mol/L, pH6.8):称取4.35g Na3PO4·12H2O,10.39g Na2HPO4·7H2O溶解于800ml水中。临用前用约5g抗坏血酸调节pH至6.8。(注:叶酸对光、热敏感,易被氧化破坏,抗坏血酸有助于保护叶酸被氧化。)(3) 鸡胰酶溶液: 称取100mg干燥的鸡胰酶(Difco公司)(注:含有叶酸轭合酶,用于水解叶酸多谷氨酸盐), 加入20ml磷酸缓冲液制成匀浆,3000rpm离心10min,取上清液备用。临用前现配。(4) 蛋白酶-淀粉酶溶液:分别称取200mg蛋白酶(Sigma公司)和淀粉酶(Sigma公司),加入20ml磷酸缓冲液制成匀浆,离心3000rpm 10min,取上清液备用。临用前配制。(5) 2+8乙醇溶液:量取20ml无水乙醇溶液,加入80ml水混匀。(6) 01mol/L NaOH: 称取0.4g氢氧化钠,加2+8乙醇溶液溶解并稀释至1L。(7) 10mol/L NaOH。称取400g氢氧化钠,加水溶解并稀释至1L。(8) 叶酸标准储备液(200mg/ml):准确称取200mg叶酸标准品(Sigma公司,纯度大于98%),用0.01mol/L NaOH溶解并定容至1L。储存于棕色瓶中。(9) 叶酸标准中间液(200ng/ml):准确吸取1.0ml叶酸标准储备液,用0.01mol/L NaOH 溶解并定容至1L。储存于棕色瓶中。待标定。标定:准确吸取1ml叶酸标准中间液,用0.1mol/L NaOH定容至10ml。以0.1mol/L NaOH调0点,比色杯厚度1cm,波长256nm,测定3次紫外吸光度值,取平均值,按下式计算标准中间液浓度。 X1 = `A ×M ×10×106 …………………(1) E 式中: X1 -- 叶酸标准中间液浓度,ng/ml;A -- 标准中间液平均紫外吸光度值;E -- 摩尔消光系数24,500;M -- 叶酸分子量441.42;10-- 测定紫外吸光度值时的稀释倍数;106 -- 由g/L换算成ng/ml的换算系数。(10) 叶酸标准工作液(0.2ng/ml):准确吸取1.0ml叶酸标准中间液,用磷酸缓冲液稀释定容至1L。(11) 2.4mol/L HCl:量取20ml浓盐酸,加水稀释至100ml。(12) 酶解酪蛋白溶液:将8g碳酸氢钠溶解于1L水中,加入60g去维生素酪蛋白(Sigma 公司),用10mol/L NaOH调节pH至 8.0(调pH时应小心,不要过碱后再加酸反复调节,避免酪蛋白结块)。加入300mg胰酶,搅拌20min,使胰酶混匀充分。再加入2.5ml甲苯,置37℃恒温箱酶解48~72h(此步骤是将酪蛋白酶解为L.C可以利用的小分子肽。酶解时间不易超过72h,如时间过长,配成的培养基不利于细菌生长)。将酪蛋白液从恒温箱中取出,121℃高压30min以终止反应并去除甲苯。冷却,加10g硅藻土搅拌,用垫有滤纸的布氏漏斗过滤。向滤液中加入约60ml冰乙酸调节pH至3.7。称取活性炭12g,加入滤液中搅拌10min,用布氏漏斗过滤,重复3次。每次过滤时,布氏漏斗内加有10g硅藻土协助过滤。最后滤液用水稀释至1200ml,4℃冰箱保存1年(活性碳可吸附酪蛋白中的叶酸以减少试剂空白,同时也可吸附肽及氨基酸,应注意控制搅拌时间)。取10ml酶解后的酪蛋白溶液加入已称重的蒸发皿中,沸水浴蒸发至干。将蒸发皿置于100℃恒温烤箱内干燥至恒重,在干燥器中冷却至室温。称量蒸发皿的重量,蒸发皿内固体重量,如固体重量小于400mg,即每毫升酪蛋白溶液中固体含量。